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目标信息素的环化进行的非常顺利不过徐云并没有因此而产生丝毫松懈。
这间生物医药实验室的使用时间是十四天虽然明面上来说课题组只要在这个时间内解决四代吡虫啉的合成就能算成功。
但先前提及过徐云的终极目标远远不是一个四代这么简单。
这次实验由于需要用到大量设备的缘故整个项目从立项开始便借用了田良伟辅项项目的名义。
一旦时限完结届时哪怕是田良伟也很难再给徐云提供这么好的实验条件。
因此这可以说是徐云当前最好的机会一旦将它错过轻则拖后第五代吡虫啉的研发重则可能影响到知识点和时空副本的开启。
所以在对目标信息素完成环化后徐云等人丝毫没有懈怠一边继续进行了12小时的搅拌反应。
并于次日凌晨在冰浴冷却下用饱和nh4cl水溶液进行了淬灭反应。
到了这一步剩下的便是将信息素结合蛋白于吡虫啉进行合成的环节了也是几位生物研究生的主方向。
这个环节通俗点来说就是无限次的碰运气环化后的信息素结合蛋白好比是一个铁环为了好理解就假设将它按时钟刻度分成十二格吧。
徐云等人要做的就是拿个小钢珠从上往下丢由于他们对9到12点钟方向做过了环化处理所以钢珠的落点必然是9-12之间。
但这个刻度远远不够精细钢珠只有稳稳的落到46分这个数字上徐云等人的合成才能算成功——请注意这只是宏观角度上一个比较好理解的说法实际上那个圆盘的刻度数字要比12大上无数倍比如是
“22440484对!”
实验室内周佩瑶看着illuminahiseq高通量二代测序平台测序出的数字平稳的对徐云说道:
“学长我们通过小分子荧光竞争性结合实验研究了两个obp与目标信息素的结合能力一共获得的碱基数据量约为66 g过滤掉原始数据后的读数为22440484。
目标信息素与美洲大蠊样本的基因组比对一致性为8462 %左右德国小蠊则为8368%结合部读数的理论值为648!”
22440484比648三万五千分之一的概率这绝不是一件简单的事儿。
听到这个数字徐云轻轻点了点头转而看向裘生:
“老裘看咱俩的了。”
裘生一拍他肩膀笑道:
“没啥说的肝呗大不了把哥们的这一头秀发都牺牲在这儿嘛。”
说着他表情一肃拿起一条类似超市小票的纸条看了几眼:
“1910和1936kda蛋白质电泳条带的位置与预测的分子量一致小任直接上荧光竞争结合试验吧。
争取三个小时内把311-二甲基正二十七烷-2-酮和目标信息素的结合能力测出来这样咱们会轻松很多。”
一旁任永存扶了扶眼镜熟练的将早就准备好的两个试剂结合到了一起。
徐云则站到了在保持通风的超净台内加入定量好的目标信息素1μg、anchored oligo4 μg、2xesreaction mix 10μl、gdnaremover 1μl最后加入rnase-free water至混合液体积为20 μl。
随后他将20μl混合液轻弹试管混匀递给周佩瑶:
“小周设定42 c在pcr仪器中孵化15分钟然后85°加热5秒。
再把合成的cdna模板定量12 %琼脂糖凝胶电泳检测合格后储存到零下二十度的环境里。”
周佩瑶接过试管重重点头:
“您放心吧学长!”
如果说昨天的环化实验是一篇克苏鲁狗粮文的话那么今天的合成实验则无疑是个治愈的小故事。
沉睡中它被唤醒了。
身边的同行催促着它:
“喂喂该起来了自从上个周期开始你就一直没动过呢。”
哦它想起来了它是是一个线解聚合酶还没有遇到它的sigma因子。
虽然前几天才刚过圣诞但对它来说那不过是一个寻常的夜晚。
他就跟着同伴走啊走不知过了多久它的耳边传来一声温柔的呼唤。
“你好吗?”
它扭过头看到一个美丽的倩影亭亭玉立笑颜如花。
它一时竟然不知道如何回答只能干巴巴道:
“你你好呀。”
她太美了它不敢祈求什么或许她只是来问最近的启动子在哪儿那里的聚合酶比它的合成能力可强得多了。
“那个我是一个oligo引物不小心迷路了能麻烦你给我指个路吗?”
它看着她的眼睛不假思索地说:
“好呀。”
它绅士地连接起她的结合域她羞涩地默许了它们就这样在核基质里散着步和她一起数着染色体上美丽的条带。
就这样不知过了多少个周期。
某天她突然惊喜地摇着它的β钳子:
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